響應面設計法是可靠的實驗設計及分析方法, 可通過過程的回歸擬合計算出響應于各因素水平的 響應值,在提取試驗中往往能夠得到最優工藝參數, 是解決多變量問題的一種有效統計方法。根據單因素試驗的結果,采用響應面法進一步 優化乙醇提取阿納其根總黃酮的提取工藝,同時,基 于前期研究發現的其具有改善岡田酸( okadaic acid, OA) 對 PC12 細胞損傷的作用基礎上。調溫電熱套( DZTW 型,北京市永光明醫療儀器 有限公司) ; 電子分析天平( SQP 型,德國賽多利斯) ; 恒溫水浴鍋( XMTD - 7000 型,北京市永光明醫療儀 器有 限 公 司) ; 酶 標 儀 ( Go 1510 型,美 國 Thermo Fisher) ; 旋轉蒸發器( RE - 52AA 型上海亞榮生化儀 器廠) ; 循環水式多用真空泵( SHB - BA95 型,鞏義 市英峪 予 華 儀 器 廠) ; 數控超聲波清洗器 ( KQ - 250DE 型,昆山市超聲儀器有限公司) ; 垂直電泳儀( 125 - BR 型,美國 Bio - Rad 公司) ; 凝膠成像系統 ( Gel Doc XR 型,美國 Bio - Rad 公司) ; 高速冷凍離 心機( Allegra 64R 型,德國 Benkman 公司) 。
在提取時間為 60 ~ 100 min 范圍內,隨著提取時間延長,總黃酮得 率先提高后降低,于 2 h 時最高,故選取提取時間 1 ~ 3 h 進行響應面優化分析。在提 取次數為 1 ~ 4 次范圍內,隨著提取次數增加,總黃 酮得率先增大后減小,于提取 2 次時最大,故最終確 定最佳提取次數為 2 次。在乙醇濃 度為 60% ~ 90% 范圍內,隨著乙醇濃度升高,總黃酮 得率先增大后減小,乙醇濃度為 70% 時,總黃酮的提 取效果最好,故選擇乙醇濃度 60% ~ 80% 進行響應 面優化分析。在提取溫度為 60 ~ 100℃范圍內,總黃酮得率呈現先升后降的趨勢,于 提取溫度為 80℃時達到最高,之后有所下降,故選取 提取溫度為 70 ~ 90℃進行響應面優化分析。