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免疫層析快速檢測(cè)優(yōu)化之紫外分析儀使用。

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2022-09-19 09:00【

    檢測(cè) ZEN 比較常用的方法有薄層色譜、 高 效液相色譜 (HPLC) 等儀器分析方法, 以及 ELISA、 免疫層析等免疫學(xué)檢測(cè)方法。 儀器分析靈敏度雖高, 但成本高、 操作復(fù)雜, 不適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。 免疫學(xué) 方法尤其是免疫層析檢測(cè)方法因快速簡(jiǎn)便, 特異性強(qiáng) 等優(yōu)點(diǎn)在快速篩查和檢測(cè)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。 隨著檢測(cè)需求的提升, 傳統(tǒng)免疫層析方法的靈 敏度已經(jīng)無(wú)法滿足檢測(cè)需求, 一些新型標(biāo)記材料陸續(xù)出現(xiàn), 量子點(diǎn) ( quantum dots, QDs) 靈敏度高、 發(fā) 光穩(wěn)定、 不易分解, 與免疫層析技術(shù)結(jié)合后, 既可以 提高檢測(cè)靈敏度, 又能進(jìn)行定量檢測(cè)。免疫熒光讀數(shù)儀購(gòu)自 QIAGEN 公司; ZF7 三用紫 外分析儀購(gòu)自鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司; 多功能 冷凍離心機(jī)購(gòu)自 Sigma 公司。

ZF7三用紫外分析儀


    基于優(yōu)化后的反應(yīng)體系組裝的熒光免疫層析試紙 條檢測(cè)玉米樣品中 ZEN。 線性回歸 方程為 y = - 0. 532 5x + 0. 937 2, 根據(jù)回歸方程計(jì)算 IC50為 6. 6 ng / mL, 檢測(cè)范圍為 1. 2 ~ 37. 3 ng / mL, 檢 測(cè)靈敏度為 1. 2 ng / mL。靜電吸附和共價(jià)偶聯(lián)是 QDs 與生物分子連接的 2 種方式。 本試驗(yàn)采用水溶性羧基修飾的量子點(diǎn) 標(biāo)記 ZEN 單克隆抗體制備熒光免疫探針, 免疫探針 的質(zhì)量直接影響免疫層析試紙的靈敏度及穩(wěn)定性, 因 此本試驗(yàn)對(duì)熒光免疫探針的制備過(guò)程進(jìn)行了系統(tǒng)的優(yōu) 化。 分別優(yōu)化了 EDC、 NHS 的加入量、 抗體的投入 量以及熒光免疫探針的重懸緩沖體系等, 并利用免疫 層析試紙系統(tǒng)對(duì)熒光免疫探針優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行判定, 利 用試紙系統(tǒng)選擇的熒光免疫探針制備條件將更適合熒 光免疫層析試紙的建立。